Egwyddor
Mae electrofforesis ffilm asetad cellwlos yn ddull electrofforesis gan ddefnyddio ffilm asetad cellwlos fel cynhaliaeth.Gelwir y ffenomen lle mae gronynnau wedi'u gwefru yn symud tuag at yr electrod gyferbyn o dan weithred maes trydan yn electrofforesis.Gan fod gan bob protein bwynt isoelectric penodol, os yw protein yn cael ei roi mewn hydoddiant gyda pH yn is na'i bwynt isoelectric, bydd y protein yn cael ei wefru'n bositif ac yn symud tuag at yr electrod negyddol.I'r gwrthwyneb, mae'n symud i'r polyn cadarnhaol.Oherwydd bod cyflymder moleciwlau protein sy'n symud mewn maes trydan yn gysylltiedig â'u gwefr, siâp a maint y moleciwlau, gellir gwahanu gwahanol broteinau gan electrofforesis.Mae serwm yn cynnwys amrywiaeth o broteinau, ac mae gan bob un ohonynt bwyntiau isoelectric ar pH7.5 neu lai.Pan roddir serwm mewn byffer pH 8.6 i redeg electrofforesis, mae pob protein serwm yn cael ei wefru'n negyddol a bydd yn symud tuag at yr ochr bositif yn y maes trydan.Gan fod gan wahanol broteinau serwm wahanol daliadau ar yr un pH, mae'r gronynnau moleciwlaidd yn wahanol o ran maint, ac felly mae'r cyflymder mudo yn wahanol, ac maent yn cael eu gwahanu gan electrofforesis.Dangosir pwyntiau iselectrig a phwysau moleciwlaidd proteinau serwm yn y tabl isod:
| Protein | Pwyntiau isoelectrig (PI) | Pwysau moleciwlaidd |
| Albwm | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-gloulin | 6.85 ~ 7.50 | 156 000 ~ 300 000 |
Yr arbrawf yw gwahanu gwahanol broteinau mewn serwm gwaed gyda philen asetad cellwlos (abbr. CAM) fel cyfrwng cynnal.Mae CAM yn fath o doiledau ewynnogeffilm gyda gwisg dda, ac mae'r trwch yn 0.1mm-1.5mm, sydd ag amsugno dŵr penodol.
Deunyddiau, offerynnau ac adweithyddion ar gyfer electrofforesis CAM
Samplau:serwm gwaed dynol iach
Offeryn:cyflenwad pŵer DYY-6C, tanc electrofforesis DYCP-38C, llwytho sampl uwch WD-9404
Yr adweithyddion
1) bilen asetad cellwlos 7X9cm
2) PH 8.6 toddiant byffer barbitol (cryfder ïonig 0.05-0.09, mae'n amser 0.06tid.): cymerwch 1,84g asid barbitwrig Dietyl, ac yna cymerwch 1.03g pentobarbital sodiwm Diethyl, ychwanegwch rywfaint o ddŵr distyll i'w gynhesu i hydoddi, a gwnewch hyd at 1000ml;
3) staen: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, ychwanegu dŵr distyll 100ml;
4) TBS/T neu PBS/T: 45ml 95% ethanol, asid asetig rhewlifol 5ml, ychwanegu 50ml o ddŵr distyll;
5) Ateb Glanhau: ethanol anhydrus 70ml, asid asetig rhewlifol 30ml.
Arbrawf Method
1) Paratowch y bilen: Trochwch y bilen i mewn i'r datrysiad byffer barbitol 30min-8h, a'i dynnu allan, tynnwch yr ateb ychwanegol trwy bapur amsugnol.
2) Llwytho samplau: Gwahaniaethwch ochr garw ac ochr llyfn y bilen, a marciwch linell ar bellter 1.5cm i'r pen uchaf ar yr ochr garw.Llwytho samplau gan offeryn llwytho sampl uwchraddol ar yr ochr garw.Nodyn: Dylid llwytho'r samplau ar ochr garw'r bilen.Ar ôl i'r samplau serwm gael eu treiddio'n llawn i bilen, trowch y bilen drosodd, rhowch yr ochr garw (gyda samplau) wyneb i lawr i'r tanc, a gosodir y diwedd gyda samplau mewn electrod negyddol.
3) Electrofforesis: Trowch ar y cyflenwad pŵer, 0.4～Pilen 0.6m A / cm, yr amser rhedeg yw 30-45 munud.Ar ôl rhedeg electrofforesis, trowch y pŵer i ffwrdd.
4) Lliwio a glanhau: Tynnwch y bilen allan o'r tanc, a'i drochiit i mewn i'r toddiant llifyn am 5 munud, ac yna ei lanhau yn yr ateb glanhau drosodd a throsodd am 3-4 gwaith nes bod y lliw cefndir yn glir.Dylid dangos y proteinau serwm ar y bandiau, ac fel arfer mae pum parth, yn ffurfio pen uchaf y llinell farcio, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) cadw: rhowch y elecrtophoresis sychbandmewn toddiant glanhau am 10-15 munud, ac yna tynnwch ef allan a'i gludo ar wydr glân, ar ôl iddo sychu, bydd yn dod yn ffilm dryloywband.
ArbrawfCanlyniad
Mae effaith gwahanu samplau serwm yn dda, ac nid oes unrhyw ffenomen cynffon band.Mae ailadroddadwyedd y canlyniadau yn amrywio oherwydd y gweithdrefnau prawf a dulliau'r arbrofwr, ac mae'r ailadroddadwyedd yn uchel.
Casgliad
Y system canfod electrofforesis clinigol cyflym (Tanc electrofforesisDYCP-38C,cyflenwad pŵerDYY-6C a llwytho sampl uwchraddol WD-9404) a gynhyrchwyd gan eincwmni Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdyn bodloni gofynion arbrofol,amae'r canlyniadau'n atgynhyrchadwy, yn syml ac yn gyflym, yn addas ar gyferDysguymchwil.
Beijing LiuyiMae Biotechnology Co., Ltd yn arbenigo mewn gweithgynhyrchu cynhyrchion elecrtophoresis ar gyfer diwydiant gwyddor bywyd, syddMae ganddo fwy na 50 mlynedd o hanes yn Tsieina a gall y cwmni ddarparu cynhyrchion sefydlog o ansawdd uchel ledled y byd.Trwy flynyddoedd o ddatblygiad, mae'n deilwng o'ch dewis!
Rydym nawr yn chwilio am bartneriaid, croesewir tanc electrofforesis OEM a dosbarthwyr.
Am ragor o wybodaeth amdanom ni, cysylltwch â ni trwy e-bost[e-bost wedi'i warchod]neu[e-bost wedi'i warchod].
Amser postio: Tachwedd-14-2022