Electrofforesis gel yw un o'r prif ddulliau a ddefnyddir mewn bioleg foleciwlaidd ar gyfer dadansoddi DNA.Mae'r dull hwn yn golygu mudo darnau o DNA trwy gel, lle cânt eu gwahanu ar sail maint neu siâp.Fodd bynnag, a ydych erioed wedi dod ar draws unrhyw wallau yn ystod eich arbrofion electrofforesis, megis bandiau taeniad ar y gel agarose, neu ddim bandiau ar y gel?Beth allai fod achos y gwallau hyn?
Mae ein technegwyr wedi crynhoi parau o ddatrys problemau yma er mwyn i chi gyfeirio atynt.
1. Bandiau taenu ar gel agarose
●Cafodd y DNA ei ddiraddio.Osgoi halogiad niwcleas.
● Nid yw'r byffer electrofforesis yn ffres.Ar ôl defnyddio byffer electrofforesis dro ar ôl tro, mae'r cryfder ïonig yn gostwng, ac mae ei werth pH yn cynyddu, felly mae'r gallu byffer yn gwanhau, sy'n effeithio ar yr effaith electrofforesis.Argymhellir disodli'r byffer electrofforesis yn aml.
● Defnyddiwyd amodau electrofforesis amhriodol.Peidiwch â gadael i foltedd fod yn uwch na 20 V/cm, a chynnal tymheredd <30°C yn ystod electrofforesis.Ar gyfer yr electrofforesis llinyn DNA anferth, dylai'r tymheredd fod <15°C. Gwiriwch fod gan y byffer electrofforesis ddigon o gapasiti byffer.
● Roedd gormod o DNA wedi'i lwytho ar y gel.Lleihau faint o DNA.
● Gormod o halen yn y DNA.Defnyddiwch ddyddodiad ethanol i gael gwared â gormodedd o halwynau yn uwch.
● Roedd y DNA wedi'i halogi â phrotein.Defnyddiwch echdynnu ffenol i gael gwared ar brotein uwch.
● Roedd y DNA wedi'i ddadnatureiddio.Peidiwch â chynhesu cyn electrofforesis.DNA gwanedig mewn byffer gyda 20 mM NaCl.
2. Anomaleddau mudo band DNA
● Ailnatureiddio safle COS darn λHind III.Cynhesu DNA am 5 munud o dan 65 ° C cyn electrofforesis, ac yna ei oeri ar uned iâ am 5 munud.
● Defnyddiwyd amodau electrofforesis amhriodol.Peidiwch â gadael i foltedd fod yn uwch na 20 V/cm, a chynnal tymheredd <30°C yn ystod electrofforesis.Gwiriwch fod gan y byffer electrofforesis ddigon o gapasiti byffer.
● Roedd y DNA wedi'i ddadnatureiddio.Peidiwch â chynhesu cyn electrofforesis.DNA gwanedig mewn byffer gyda 20 mM NaCl.
3. Llew neu ddim bandiau DNA ar gel agarose
● Nid oedd digon na chrynodiad digonol o DNA wedi'i lwytho ar y gel.Cynyddu faint o DNA.Mae electrofforesis gel polyacrylamid ychydig yn fwy sensitif nag electrofforesis agarose, a gellir lleihau'r llwyth sampl yn briodol.
● Roedd y DNA wedi'i ddiraddio.Osgoi halogiad niwcleas.
● Roedd y DNA wedi'i electrofforesi oddi ar y gel.Electrofforese y gel am lai o amser, defnyddio foltedd is, neu ddefnyddio gel y cant uwch.
● Defnyddiwyd ffynhonnell golau W amhriodol ar gyfer delweddu DNA â staen bromid ethidium.Defnyddiwch olau tonfedd fer (254 nm) W i gael mwy o sensitifrwydd.
4. Bandiau DNA ar goll
●Cafodd y DNA maint bach ei electrofforesi oddi ar y gel.Electrofforese y gel am lai o amser, defnyddio foltedd is, neu ddefnyddio gel y cant uwch.
● Anodd gwahaniaethu rhwng bandiau DNA moleciwlaidd tebyg.Cynyddwch yr amser electrofforesis, a gwiriwch y crynodiado'r gel i sicrhau bod y gel yn cael ei ddefnyddio'n gywir.
● Roedd y DNA wedi'i ddadnatureiddio.Peidiwch â chynhesu cyn electrofforesis.DNA gwanedig mewn byffer gyda 20 mM NaCl.
● Mae'r llinynnau DNA yn enfawr, ac nid yw electrofforesis gel confensiynol yn addas.Dadansoddi ar electrofforesis gel pwls.Pa faterion eraill ydych chi wedi'u cael gydag electrofforesis gel agarose?Byddwn yn ymchwilio mwy am ganllawiau yn y dyfodol.
Mae Beijing Liuyi biotechnology Co, Ltd (Liuyi Biotech) yn gwmni arbenigol sy'n canolbwyntio ar gynhyrchion sy'n gysylltiedig ag electrofforesis yn Tsieina.Mae ei stori yn dechrau yn 1970 pan nad oedd Tsieina eto wedi mynd i mewn i'r diwygio ac agor amser.Trwy ddatblygiad blynyddoedd, mae gan Liuyi Bitotech ei frand ei hun, a elwir yn Brand Liuyi yn y farchnad ddomestig ar gyfer cynhyrchion electrofforesis.
Mae gan frand Liuyi fwy na 50 mlynedd o hanes yn Tsieina a gall y cwmni ddarparu cynhyrchion sefydlog o ansawdd uchel ledled y byd.Trwy ddatblygiad blynyddoedd, mae'n deilwng o'ch dewis!
Mae celloedd electrofforesis llorweddol (tanciau / siambrau) Liuyi Biotech o ansawdd uchel gydag ymddangosiad da.Gyda gwahanol feintiau o hambyrddau gel, gallant gwrdd â'ch gofynion arbrofol gwahanol.Mae gennym ein tîm technegol a'n ffatri ein hunain.O ddylunio i weithgynhyrchu, y deunyddiau crai i'r rhannau allweddol, gallwn reoli'r broses gyfan.Mae'r gyfres DYCP 31 ar gyfer electrofforesis DNA, sy'n fodelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, aDYCP-31E.Y gwahaniaethau yn eu plith yw maint gel a phris.Rydym yn darparu meintiau llawn o gynnyrch ar gyfer ein cwsmeriaid.Y modelDYCP-32Cyn gallu gwneud y gel mwyaf yn 250mm * 250mm.
Yn y cyfamser, rydym yn argymell ein cyflenwad pŵer electrofforesisDYY-6C,DYY-6DaDYY-10Car gyfer ein celloedd electrofforesis (tanciau / siambrau) cyfres DYCP-31 a 32.
Os ydych chi eisiau mwy o wybodaeth am y cynhyrchion, ewch i'r wefan hon i gael mwy, a chroeso i chi gysylltu â ni trwy e-bost i roi gwybod i ni beth rydych chi ei eisiau, a gweld a allwn ni ddarparu'r atebion i chi.
Am ragor o wybodaeth amdanom ni, cysylltwch â ni trwy e-bost[e-bost wedi'i warchod], [e-bost wedi'i warchod].
Amser postio: Mai-09-2022