Beth yw electrofforesis gel polyacrylamid?

Electrofforesis Gel Polyacrylamid

Mae electrofforesis gel yn dechneg sylfaenol mewn labordai ar draws y disgyblaethau biolegol, sy'n caniatáu gwahanu macromoleciwlau fel DNA, RNA a phroteinau. Mae cyfryngau a mecanweithiau gwahanu gwahanol yn caniatáu i is-setiau o'r moleciwlau hyn gael eu gwahanu'n fwy effeithiol trwy fanteisio ar eu nodweddion ffisegol. Ar gyfer proteinau yn benodol, electrofforesis gel polyacrylamid (TUDALEN) yn aml yw'r dechneg o ddewis.

Mae PAGE yn dechneg sy'n gwahanu macromoleciwlau megis proteinau yn seiliedig ar eu symudedd electrofforetig, hynny yw, gallu dadansoddwyr i symud tuag at electrod â'r wefr gyferbyniol. Yn TUDALEN, mae hyn yn cael ei bennu gan wefr, maint (pwysau moleciwlaidd) a siâp y moleciwl. Mae analytes yn symud trwy fandyllau a ffurfiwyd mewn gel polyacrylamid. Yn wahanol i DNA ac RNA, mae proteinau'n amrywio o ran gwefr yn ôl yr asidau amino a ymgorfforir, a all ddylanwadu ar sut maent yn rhedeg. Gall llinynnau asid amino hefyd ffurfio strwythurau eilaidd sy'n effeithio ar eu maint ymddangosiadol ac o ganlyniad sut y gallant symud trwy'r mandyllau. Felly, gall fod yn ddymunol weithiau dadnatureiddio proteinau cyn electrofforesis i'w llinoleiddio os oes angen amcangyfrif mwy cywir o'r maint.

TUDALEN SDS

Mae electrofforesis gel polyacrylamid sodiwm-dodecyl sylffad yn dechneg a ddefnyddir i wahanu moleciwlau protein o fasau 5 i 250 kDa. Mae'r proteinau'n cael eu gwahanu ar sail eu pwysau moleciwlaidd yn unig. Ychwanegir sodiwm dodecyl sylffad, syrffactydd anionig, wrth baratoi geliau sy'n cuddio gwefrau cynhenid ​​​​y samplau protein ac yn rhoi cymhareb gwefr i fàs tebyg iddynt. Mewn geiriau syml, mae'n dadnatureiddio'r proteinau ac yn rhoi gwefr negyddol iddynt.

TUDALEN Brodorol

Mae TUDALEN Brodorol yn dechneg sy'n defnyddio geliau heb eu dadnatureiddio i wahanu proteinau. Yn wahanol i SDS PAGE, ni ychwanegir unrhyw asiant dadnatureiddio wrth baratoi geliau. O ganlyniad, mae gwahanu proteinau yn digwydd ar sail tâl a maint y proteinau. Yn y dechneg hon, cadwyni cydffurfiad, plygu ac asid amino y proteinau yw'r ffactorau y mae'r gwahaniad yn dibynnu arnynt. Nid yw'r proteinau yn cael eu difrodi yn y broses hon, a gellir eu hadfer ar ôl cwblhau'r gwahaniad.

Sut mae electrofforesis gel polyacrylamid (TUDALEN) yn gweithio?

Egwyddor sylfaenol PAGE yw gwahanu dadansoddwyr trwy eu pasio trwy fandyllau gel polyacrylamid gan ddefnyddio cerrynt trydan. I gyflawni hyn, mae cymysgedd acrylamid-bisacrylamid yn cael ei bolymeru (polyacrylamid) trwy ychwanegu persylffad amoniwm (APS). Mae'r adwaith, sy'n cael ei gataleiddio gan tetramethylethylenediamine (TEMED), yn ffurfio adeiledd tebyg i rwyd gyda mandyllau y gall analytau symud drwyddo (Ffigur 2). Po uchaf yw'r ganran o gyfanswm yr acrylamid sydd wedi'i gynnwys yn y gel, y lleiaf yw maint y mandwll, felly'r lleiaf yw'r proteinau a fydd yn gallu pasio drwodd. Bydd y gymhareb o acrylamid i bisacrylamid hefyd yn effeithio ar faint mandwll ond mae hyn yn aml yn cael ei gadw'n gyson. Mae meintiau mandwll llai hefyd yn lleihau'r cyflymder y mae proteinau bach yn gallu symud trwy'r gel, gan wella eu cydraniad a'u hatal rhag rhedeg i ffwrdd yn gyflym i'r byffer pan ddefnyddir cerrynt.

Offer ar gyfer Electrofforesis Gel Polyacrylamid

Cell Electrofforesis Gel (Tanc/Siambr)
Mae'r tanc gel ar gyfer electrofforesis gel polyacrylamid (TUDALEN) yn wahanol i'r tanc gel agarose. Mae'r tanc gel agarose yn llorweddol, tra bod y tanc TUDALEN yn fertigol. Trwy gell electrofforesis fertigol (tanc / siambr), mae gel tenau (fel arfer 1.0mm neu 1.5mm) yn cael ei dywallt rhwng dau blât gwydr a'i osod fel bod gwaelod y gel yn cael ei foddi mewn byffer mewn un siambr a bod y brig yn cael ei foddi mewn byffer. mewn siambr arall. Pan ddefnyddir cerrynt, mae ychydig bach o glustog yn mudo trwy'r gel o'r siambr uchaf i'r siambr waelod. Gyda clampiau cryf i warantu bod y cynulliad yn aros mewn sefyllfa unionsyth, mae'r offer yn hwyluso rhediadau gel cyflym gydag oeri gwastad gan arwain at fandiau gwahanol.

Mae Beijing Liuyi Biotechnology Co, Ltd (Liuyi Biotechnology) yn cynhyrchu ystod o feintiau o gelloedd electrofforesis gel polyacrylamid (tanciau / siambrau). Mae'r modelau DYCZ-20C a DYCZ-20G yn gelloedd electrofforesis fertigol (tanciau / siambrau) ar gyfer dadansoddi dilyniannu DNA. Mae rhai o'r celloedd electrofforesis fertigol (tanciau / siambrau) yn gydnaws â system blotio, fel y model DYCZ-24DN, DYCZ-25D a DYCZ-25E yn gydnaws â model system Western Blotting DYCZ-40D, DYCZ-40G a DYCZ-40F, a ddefnyddir ar gyfer trosglwyddo'r moleciwl protein o'r gel i'r bilen. Ar ôl electrofforesis SDS-PAGE, mae Western Blotting yn dechneg i ganfod protein penodol mewn cymysgedd protein. Gallwch ddewis y systemau blotio hyn yn unol â'r gofynion arbrofol.

Cyflenwad Pŵer Electrofforesis
Er mwyn darparu'r trydan ar gyfer rhedeg y gel, bydd angen cyflenwad pŵer electrofforesis arnoch. Yn Liuyi Biotechnology rydym yn darparu ystod o gyflenwadau pŵer electrofforesis ar gyfer pob cais. Gall y model DYY-12 a DYY-12C gyda foltedd a cherrynt sefydlog uchel fodloni electrofforesis gofyniad foltedd uchel. Mae ganddo swyddogaeth stondin, amseru, VH a chymhwysiad cam wrth gam. Maent yn ddelfrydol ar gyfer cymhwyso electrofforesis dilyniannu IEF a DNA. Ar gyfer cymhwysiad electrofforesis protein a DNA cyffredinol, mae gennym y model DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ac yn y blaen, sydd hefyd yn gyflenwadau pŵer gwerthu poeth gyda chelloedd electrofforesis (tanciau / siambrau). Gellir defnyddio'r rhain ar gyfer y cymwysiadau electrofforesis foltedd canol ac isel, megis ar gyfer defnydd labordy ysgol, labordy ysbyty ac ati. Mwy o fodelau ar gyfer cyflenwadau pŵer, ewch i'n gwefan.

Mae gan frand Liuyi fwy na 50 mlynedd o hanes yn Tsieina a gall y cwmni ddarparu cynhyrchion sefydlog o ansawdd uchel ledled y byd. Trwy ddatblygiad blynyddoedd, mae'n deilwng o'ch dewis!

Am ragor o wybodaeth amdanom ni, cysylltwch â ni trwy e-bost[e-bost wedi'i warchod] or [e-bost wedi'i warchod].

Cyfeiriadau ar gyfer Beth yw electrofforesis gel polyacrylamid?
1. Karen Steward PhD Electrofforesis gel polyacrylamid, Sut Mae'n Gweithio, Amrywiadau Techneg, a Ei Gymwysiadau