1. Dosbarthiad
Rhennir electrofforesis gel yn fathau fertigol (gan gynnwys geliau colofn a geliau slab) a mathau llorweddol (geliau slab yn bennaf) (Ffigur 6-18). Yn gyffredinol, mae gwahaniad fertigol ychydig yn well na llorweddol, ond mae gan baratoi gel llorweddol o leiaf bedair mantais: mae cefnogaeth o dan y gel cyfan, sy'n caniatáu defnyddio agarose crynodiad isel; mae'n bosibl paratoi platiau gel agarose o wahanol fanylebau; mae paratoi gel a llwytho sampl yn fwy cyfleus; mae'r siambr electrofforesis yn hawdd i'w hadeiladu ac yn gost-effeithiol. Gan fod electrofforesis llorweddol yn cael ei berfformio gyda'r plât gel agarose wedi'i foddi'n llawn tua 1mm o dan wyneb y byffer electrofforesis, fe'i gelwir hefyd yn electrofforesis tanddwr.
Tanc electrofforesis DYCP-31DN ar gyfer electrofforesis gel agarose
System 2.Buffer
Wrth wahanu asid niwclëig, mae'r rhan fwyaf o systemau'n mabwysiadu systemau parhaus. Mae byfferau electrofforesis a ddefnyddir yn gyffredin yn cynnwys TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L asid borig, 0.0024mol/L EDTA) byffer a THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L asetad sodiwm, 0.0018mol/L EDTA) byffer. Yn gyffredinol, caiff y byfferau hyn eu paratoi fel hydoddiannau stoc 10x a'u gwanhau i'r crynodiad gofynnol pan gânt eu defnyddio. Mae cyfraddau mudo DNA llinol a chylchol mewn gel agarose yn amrywio yn ôl y byffer a ddefnyddir. Yn Y byffer, mae cyfradd mudo DNA llinol yn fwy na chyfradd DNA crwn, tra mewn byffer TBE, mae'r gwrthwyneb yn wir.
3.Preparation o Agarose Gel
(1) Paratoi Gel Agarose Llorweddol
(a) Paratowch y crynodiad gofynnol o gel agarose gan ddefnyddio byffer electrofforesis 1x.
(b) Cynheswch yr agarose i'w hydoddi'n llwyr naill ai mewn baddon dŵr berwedig, ar stirrer magnetig, neu mewn microdon. Oerwch yr hydoddiant agarose i 55°C ac ychwanegwch liw ethidium bromid (EB) i grynodiad terfynol o 0.5 μg/ml.
(c) Seliwch ymylon gwydr neu blatiau acrylig gydag ychydig bach o gel agarose, ychwanegwch grib, a gosodwch y dannedd crib tua 0.5 ~ 1.0 mm uwchben y plât.
(ch) Arllwyswch yr hydoddiant gel agarose wedi'i doddi yn barhaus i'r mowld gwydr neu blât acrylig (mae'r trwch yn dibynnu ar gyfaint y sampl DNA), gan osgoi cyflwyno swigod aer. Gadewch iddo galedu'n naturiol ar dymheredd ystafell.
(d) Tynnwch y crwybr yn ofalus ar ôl ei galedu'n llwyr. Ychwanegu swm priodol o glustogi electrofforesis i'r tanc gel, gan sicrhau bod y plât gel yn cael ei foddi tua 1 mm o dan wyneb y byffer electrofforesis.
(2) Paratoi Gel Agarose Fertigol
(a) Tynnwch saim neu weddillion o blatiau gwydr trwy olchi ag ethanol.
(b) Gosodwch blatiau gwahanu rhwng argaeau blaen a chefn, aliniwch ymylon y platiau gwahanu â'r argaeau blaen a chefn, a'u cysylltu â chlampiau.
(c) Ychwanegwch 2% agarose mewn byffer 1x rhwng ymylon y platiau gwahanu i ffurfio plwg agarose 1 cm o uchder ar waelod y siambr castio gel.
(ch) Arllwyswch y gel agarose wedi'i doddi ar y crynodiad a ddymunir, wedi'i baratoi mewn byffer 1x, i'r siambr gel hyd at 1 cm o dan y brig.
(d) Mewnosodwch y crib, gan osgoi dal swigod aer o dan y dannedd crib. Weithiau, gall wrinkles ymddangos ar y dannedd crib yn ystod oeri gel agarose; mewn achosion o'r fath, ychwanegwch ychydig o agarose wedi'i doddi ar y brig i'w gadarnhau.
(dd) Tynnwch y crib. Er mwyn atal gollyngiadau byffer yn y slot llwytho, selio'r cysylltiad rhwng y plât gel agarose a'r siambr electrofforesis gyda 2% agarose ac ychwanegu'r swm gofynnol o glustogi.
(g) Ychwanegu byffer electrofforesis 1x i'r siambr gel.
(f) Llwythwch samplau DNA yn ofalus ar y gel agarose o dan y byffer.
Mwy o wybodaeth am y wybodaeth sylfaenol am electrofforesis gel agarose, byddwn yn rhannu'r wythnos nesaf. Dymuno'r wybodaeth hon fod o gymorth i'ch arbrawf.
Mae Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) wedi arbenigo mewn gweithgynhyrchu offerynnau electrofforesis am fwy na 50 mlynedd gyda'n tîm technegol proffesiynol a'n canolfan ymchwil a datblygu ein hunain. Mae gennym linell gynhyrchu ddibynadwy a chyflawn o ddylunio i arolygu, a warws, yn ogystal â chymorth marchnata. Ein prif gynnyrch yw Cell Electrofforesis (tanc / siambr), Cyflenwad Pŵer Electrofforesis, Trawsoleuydd LED Glas, Trawsoleuydd UV, System Delwedd a Dadansoddi Gel ac ati.
Rydym nawr yn chwilio am bartneriaid, croesewir tanc electrofforesis OEM a dosbarthwyr.
Os oes gennych unrhyw gynllun prynu ar gyfer ein cynnyrch, mae croeso i chi gysylltu â ni. Gallwch anfon neges atom trwy e-bost[e-bost wedi'i warchod]neu[e-bost wedi'i warchod], neu ffoniwch ni ar +86 15810650221 neu ychwanegwch Whatsapp +86 15810650221, neu Wechat: 15810650221.
Sganiwch y cod QR i'w ychwanegu ar Whatsapp neu WeChat.
Amser postio: Rhag-07-2023